透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡(jiǎn)稱TEM)是一種與光學(xué)顯微鏡原理大致相同的顯微鏡,但它使用電子束作為光源,并通過(guò)電磁透鏡聚焦成像,從而實(shí)現(xiàn)原子級(jí)別的高分辨率觀察。TEM的分辨能力可以達(dá)到0.1-0.2納米,因此可以用于觀察非常微小的結(jié)構(gòu),如動(dòng)植物細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)、病原微生物、細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌或病毒侵染等。
主要設(shè)備
- 超薄切片機(jī):如Leica EM UC7,用于制作樣品的超薄切片。這些切片通常需要經(jīng)過(guò)樹(shù)脂包埋和修塊,以確保樣品足夠薄以便電子束穿透。
- 透射電鏡:如HITACHI HT7700或HT7800,這些電鏡通過(guò)加速電壓來(lái)控制電子束的波長(zhǎng),進(jìn)而影響分辨率和成像效果。
應(yīng)用范圍
- 細(xì)胞生物學(xué):觀察細(xì)胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu),如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等。
- 病理學(xué):研究病理變化,如腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等。
- 材料科學(xué):分析材料的微觀結(jié)構(gòu)和成分。
- 分子生物學(xué):研究大分子的結(jié)構(gòu),如蛋白質(zhì)復(fù)合物、病毒顆粒等。
樣品制備
為了獲得高質(zhì)量的TEM圖像,樣品的制備是關(guān)鍵步驟之一。樣品通常需要切成厚度為60-80nm的超薄切片,并經(jīng)過(guò)重金屬鉛、鈾等染色劑進(jìn)行染色,以增強(qiáng)對(duì)比度。此外,樣品需要在高真空環(huán)境中進(jìn)行觀察,以避免電子束與空氣分子碰撞而產(chǎn)生散射。
結(jié)論
透射電子顯微鏡及其相關(guān)設(shè)備如超薄切片機(jī)是實(shí)現(xiàn)TEM成像的關(guān)鍵工具。它們?cè)诙鄠€(gè)科學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,幫助科學(xué)家揭示物質(zhì)的微觀結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,TEM的應(yīng)用將會(huì)更加廣泛和深入。